1. No category

Saskia Mennen, Hanne Johnsen og Marit Seppola
marit.seppola@nofima.no
Aktivering av torskens immunforsvar
ved et tidlig utviklingsstadium
Marine fiskelarver klekkes før immunsystemet er ferdig utviklet. Det innebærer at den
immunologiske kapasiteten er begrenset i tidlige utviklings­stadier. I denne fasen er embryoene avhengig av maternalt overførte forsvarskomponenter i påvente av ­aktivering
av eget immunforsvar. ­Denne studien kartlegger om mRNA som koder for antatte
immunpro­teiner overføres fra morfisken til ubefruktede egg ved bruk av Real time PCR.
I de tilfellene der mRNA ikke var maternalt overført ble det undersøkt når ­transkripsjonen
av mRNA aktiveres i embryoutviklingen.
Relativ mRNA mengde av utvalgte gener involvert i immunforsvaret under de forskjellige
utviklingsfasene av torsk. Innfelt i figurene er det vist Real
time resultater (med Ct verdi)
fra ubefruktede egg.
100
ISG15
LGP2
90
ISG15/LGP2 i
ubefruktede egg
80
70
60
Ct>40
50
40
30
20
10
0
250
Hepcidin
Cathelicidin
Hepcidin i
ubefruktede egg
200
150
Cathelicidin i
ubefruktede egg
Ct~32
Ct~35
100
50
0
250
Lysozym i
ubefruktede egg
200
Cathepsin D i
ubefruktede egg
Lysozym
Cathepsin D
150
Ct~32
Ct~33
100
50
0
0h
3h
5h
Week 1
11 h
48 h
94 h
118 h
166 h
Week 1
216 h
262 h
358 h
Week 2
409 h
Week 3
455 h
503 h
599 h
623 h
Week 4
791 h
959 h
1127 h
1295 h
1463 h
1631 h
Week 5
Week 6
Week 7
Week 8
Week 9
Week
10
Ubefruktet
Blastula
Gastrula
Segmentering
Larve
Resultater
Konklusjoner
Det ble detektert mRNA i ubefruktede egg som koder for proteiner som antas viktig i immunforsvaret mot bakterier (lysozym, cathepsin D, hepcidin og
cathelicidin). Måling av enzymaktivitet viste at lysozym er aktivt og i stand
til å drepe bakterier allerede ved dette stadiet.
• Det ble funnet mRNA fra lysozym, cathepsin D, cathelicidin og
hepcidin i ubefruktede egg, noe som indikerer at et ­antibakterielt
forsvar er maternalt overført.
I ubefruktede egg detekteres det ikke mRNA som koder for immunproteiner
som kan være viktig i forsvar mot virus (ISG15 og LGP2). Transkripsjonen
av disse genene ble aktivert i gastrula­ fasen (118 t etter befruktning), men
fortsatt før klekking.
• Transkripsjonen av mRNA for ISG15 og LGP2 aktiveres ­118 t
etter befrukting, noe som ­indikerer at et antiviralt forsvar ikke
blir maternalt overført.
• Disse resultatene indikerer at det medfødte ­immunforsvaret
Resultatene viste at mRNA som koder for antatte antibakterielle proteiner
er viktig for overlevelse av ­embryoer og larver ved et tidlig
ble overført fra morfisken til ubefruktede egg, mens deler av det antivirale
­utviklingsstadium.
forsvaret ble aktivert på embryostadiet.
Dette prosjektet er finansiert av Norges forskningsråd (prosjekt nr. 158952 og 177033) og det norske Genofisk konsortium.
Nofima Marin, Muninbakken 9-13, Postboks 6122, NO-9291 Tromsø • www.nofima.no
Design: Oddvar Dahl, Nofima • Foto: Jensen/Mennen, Nofima
Zygote
Deling